外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cell，PBMC），是外周血中具有单个核的细胞，包括淋巴细胞（Lymphocyte）、单核细胞（Monocyte）、树突状细胞（DC）和其他少量细胞。在PBMC的单细胞测序数据中，我们一般是注释不到中性粒细胞的。这就奇怪了，中性粒细胞明明是外周血中比例最高的细胞类型，为什么单细胞中却注释不到呢？
从原理上将，单个核细胞的体积、形态和比重与外周血其它细胞不同，红细胞和多核白细胞的比重超过1.080，单个核细胞的比重为1.070左右，血小板为1.030左右。因此，利用各种血细胞和单个核细胞比重之间的差异可以将各种血细胞与单个核细胞分离开来。
Ficoll密度梯度离心法是分离PBMC最常用的方法之一。Ficoll是蔗糖的中性多聚体，平均分子量400000，当密度为1.2g/mL时，未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜，因此可以用作PBMC的分离液。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分离液比重，离心后漂浮于分离液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分层液液面上的白膜层细胞，并进行适当的清洗，就可从外周血中分离到较高纯度的单个核细胞，即PBMC。
那么，中心粒细胞去哪里了呢？下面是一张外周血瑞吉染色图片显示的中性粒细胞。大家可以看到，外周血中成熟的中性粒细胞是分叶核与杆状核的，也就是说是多个核的，而非单个核。在Ficoll或者Percoll分离时，中心粒细胞密度比较大，离心后沉到管底。因此，一般情况下，PBMC中是注释不到中性粒细胞的！